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2016醫(yī)學(xué)微生物學(xué)沖刺重點(diǎn)：副溶血弧菌
嗜鹽性弧菌，沿海地區(qū)常見，存在于近海海水、海泥、海產(chǎn)品中，1950年首發(fā)于日本大阪，主要引起食物中毒。下面是百分網(wǎng)小編分享的一些相關(guān)資料，供大家參考。
生存環(huán)境
副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)廣泛存在于海水和海產(chǎn)品中,是我國沿海地區(qū)常見的食物中毒病原菌。
副溶血弧菌嗜鹽畏酸，在無鹽培養(yǎng)基上，不能生長，3%～6%食鹽水繁殖迅速，每8～9分鐘為1周期，低于0.5%或高于8%鹽水中停止生長。在食醋中1～3分鐘即死亡，加熱56℃5～10分鐘滅活，在1%鹽酸中5分鐘死亡。
性質(zhì)
已知副溶血弧菌有12種O抗原及59種K抗原，據(jù)其發(fā)酵糖類的情況可分為5個類型。各種弧菌對人和動物均有較強(qiáng)的毒力，其致病物質(zhì)主要有分子量42000的致熱性溶血素(TDH)和分子量48000的TDH類似溶血毒(TRH)，具有溶血活性、腸毒素和致死作用。
副溶血性弧菌食物中毒也稱嗜鹽菌食物中毒，是進(jìn)食含有該菌的食物所致，主要來自海產(chǎn)品或鹽腌漬品，常見者為蟹類、烏賊、海蜇、魚、黃泥螺等，其次為蛋品、肉類或蔬菜。臨床上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要癥狀。主要病理變化為空腸及回腸有輕度糜爛，胃粘膜炎、內(nèi)臟(肝、脾、肺)淤血等。
檢測方法
溶血性試驗(yàn)
用高鹽血瓊脂培養(yǎng)基，在限定的條件下培養(yǎng)副溶血性弧菌時出現(xiàn)的溶血反應(yīng)，稱此溶血性能為“神奈川現(xiàn)象”。
此試驗(yàn)要求是用人或兔的新鮮紅血球制備高鹽血平板，經(jīng)37℃、24h培養(yǎng)，如在單個菌落周圍呈現(xiàn)透明溶血環(huán)或在菌落下面有明顯溶血者，為“神奈川現(xiàn)象”陽性，若不出現(xiàn)透明溶血環(huán)或無明顯溶血者，為“神奈川現(xiàn)象”陰性。有致病性的副溶血性弧菌，多數(shù)為神奈川現(xiàn)象陽性，但亦有少數(shù)為陰性。
血清學(xué)試驗(yàn)
副溶血性弧菌有三種抗原，即O抗原(菌體抗原)，K抗原(莢膜抗原)及H抗原(鞭毛抗原)，其中血清學(xué)分類上有意義的是前兩者：O抗原有13種血清群，K抗原有65種血清型。
進(jìn)行副溶血性弧菌血清學(xué)鑒定時，可用O抗原分群，將18-24h的培養(yǎng)物，用3%食鹽水作成較濃的菌懸液，121℃高壓1h或100℃煮沸后，用此菌懸液進(jìn)行O抗血清玻片凝集試驗(yàn)，同時用無菌生理鹽水作對照，如O凝集反應(yīng)陽性時，可用不經(jīng)加熱的菌懸液進(jìn)行K抗血清玻片凝集反應(yīng)分型判定。天津生物芯片公司的診斷血清產(chǎn)品覆蓋了該菌所有的O血清群及K血清型。
核酸擴(kuò)增試驗(yàn)
所有副溶血弧菌分離株都含有不耐熱溶血毒素(TLH)，這種溶血素是副溶血弧菌所特有的，因此它的編碼基因tlh基因常被用作檢測副溶血弧菌的靶基因。而tlh并不是一個毒素基因，真正與致病相關(guān)的是副溶血弧菌的耐熱直接溶血素(TDH)和溶血相關(guān)溶血素(TRH)，因此它們的編碼基因tdh、tlh基因常被用作副溶血弧菌致病性檢測的特異基因。基于此，天津生物芯片推出一系列常規(guī)PCR試劑盒及熒光PCR試劑盒。
1)常規(guī)PCR：鑒定標(biāo)準(zhǔn)是通過電泳來判斷是否有擴(kuò)增的核酸片段以及擴(kuò)增產(chǎn)物的大小是否正確。
2)實(shí)時熒光PCR：通過對實(shí)時熒光PCR反應(yīng)的每一個循環(huán)產(chǎn)物進(jìn)行熒光信號的實(shí)時監(jiān)測來判斷分析。
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